大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量筛选研究
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    【摘要】目的:对SD(Sprague Dawley)大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量进行筛选,获得优质凝胶图像。方法:本实验为8月龄SD大鼠,注射戊巴比妥钠麻醉后断头取海马组织,称重后加入裂解液,经过匀浆、孵育、离心等处理后测定蛋白浓度。拟采用银染法凝胶染色时上样量分别为200 ?滋g、400 ?滋g、600 ?滋g、800 ?滋g;拟采用考马斯亮蓝染法凝胶染色时上样量分别为1 000 ?滋g、1 200 ?滋g、1 400 ?滋g、1 600 ?滋g。采用双向凝胶电泳后,分别采用银染和考染法凝胶染色。染色后凝胶采用Umax PowerLookⅢ扫描仪和photoshop8.0图像软件进行扫描,采用ETTAN ImageMaster 2D Elite 4.01软件进行图像分析。结果:双向凝胶电泳胶图经扫描分析,蛋白质上样量400 ?滋g电泳银染后所获得的胶图蛋白质点区隔明显,背景清晰,经过点识别等处理后获得(756±42)个点;而蛋白质上样量200 ?滋g、600 ?滋g和800 ?滋g电泳银染后获得的胶图蛋白质点较少;蛋白质上样量1 600 ?滋g电泳考染后所获得的胶图蛋白质点区隔明显,背景清晰,经过点识别等处理后获得(812±60)个点;而蛋白质上样量1 000 ?滋g、1 200 ?滋g和1 400 ?滋g电泳考马斯亮蓝染法后获得的胶图蛋白质点较少。结论:采用银染法SD大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量为400 ?滋g时可以获得良好的凝胶图像;而采用考染法SD大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量为1 600 ?滋g时即可获得良好的凝胶图像。

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胡中华,张文超,段开明.大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量筛选研究[J].现代医药卫生,2011,27(3):321-

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