【摘要】目的研究靶向自噬相关基因5（Atg5）的小干扰RNA（siRNAs）能否诱导肝癌细胞的失巢凋亡，探讨细胞自噬是否参与肝癌细胞的失巢凋亡抵抗。方法选择高、低转移潜能的肝癌细胞HCC1LM3、SMMC17721及人胚肝细胞LO2，采用流式细胞术检测细胞在失巢培养状态下的凋亡率，采用蛋白质印迹（Westernblotting）检测细胞Atg5蛋白表达。针对Atg5的siRNAs，采用脂质体转染法转染至高转移潜能的HCC1LM3肝癌细胞，利用Westernblotting检测Atg5蛋白表达变化。在失巢状态下培养转染Atg5siRNAs的肝癌细胞HCC1LM3，流式细胞术检测肝癌细胞的失巢凋亡率，Westernblotting检测肝癌细胞中自噬小体膜蛋白LC3Ⅰ、Ⅱ型蛋白表达转变验证细胞自噬水平的变化。结果失巢培养后，HCC1LM3、SMMC17721细胞失巢凋亡率明显低于人胚肝细胞LO2，差异均有统计学意义（P<0.05）；而在两组肿瘤细胞中，HCC1LM3细胞的失巢凋亡率低于SMMC17721细胞，差异有统计学意义（P<0.05）。失巢培养后，HCC1LM3及SMMC17721细胞LC3Ⅱ型蛋白表达均较LO2细胞明显增加，差异均有统计学意义（P<0.05）。转染Atg5siRNA1和siRNA2的肝癌HCC1LM3细胞中，Atg5蛋白的表达均明显低于阴性对照HCC1LM31NC，差异均有统计学意义（P<0.05）。细胞中LC3Ⅱ型蛋白表达较阴性对照HCC1LM31NC细胞明显减少，差异有统计学意义（P<0.05）。失巢凋亡率较阴性对照HCC1LM31NC细胞明显增加，差异有统计学意义（P<0.05）。结论靶向Atg5的siRNAs能抑制肝癌细胞Atg5蛋白表达，并通过下调自噬水平来诱导肝癌细胞的失巢凋亡。