*基金项目:四川省泸州市科技基金资助项目(2015LZCYD?S01)
【摘要】目的探讨miR?345对人胰腺癌细胞增殖能力的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT?RCR)检测miR?345在胰腺癌组织标本、5株人胰腺癌细胞系及1株人正常胰腺上皮细胞系中的表达量,选取miR?345表达差异较明显的胰腺癌细胞PANC?1和SW1990细胞系进行后续实验;构建miR?345过表达慢病毒载体(lv?miR?345?U)及空载慢病毒载体(lv?NC),采用qRT?PCR检测感染效率;在体外采用细胞计数Kit?8(CCK?8)实验,采用平板克隆实验检测miR?345对胰腺癌细胞增殖能力的影响;体内建立裸鼠皮下成瘤模型,并将瘤体包埋,采用免疫组织化学实验法检测miR?345对胰腺癌细胞成瘤能力的影响;采用蛋白质免疫印迹(western?blotting)检测miR?345对预测靶点Bcl?2表达的影响。结果qRT?PCR显示,5株胰腺癌细胞系中miR?345表达量低于正常胰腺上皮细胞系(P<0.05);过表达miR?345后PANC?1和SW1990细胞增殖能力均明显受到抑制(P<0.05),细胞集落形成数量明显减少(P<0.05)。裸鼠皮下成瘤模型显示,过表达miR?345后肿瘤体积及免疫组织化学指标Ki?67均明显低于正常胰腺上皮细胞系组,差异均有统计学意义(P<0.05);上调miR?345的表达能使凋亡关键Bcl?2的表达下调。结论miR?345能在体内外有效抑制胰腺癌细胞的增殖,有可能成为胰腺癌治疗的新靶点。
杨琴,王杰,吕沐瀚,唐世孝△. miR-345抑制人胰腺癌细胞的增殖能力研究*[J].现代医药卫生,2018,34(6):828-