[摘要]目的建立同位素标记-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定血清25-羟基维生素D3的方法。方法样品经乙腈提取，饱和硫酸锌沉淀蛋白，然后用正己烷萃取，氮气吹干后85%甲醇定容上样，以0.1%甲醇水-0.1%甲酸水为流动相，经ACQUITYBEHC18(1.7μm，2.1mm×100mm)色谱柱分离，采用多重反应监测正离子模式进行检测。结果该方法在1~100ng/L内线性关系良好；检出限0.3ng/kg；3个水平加标回收率为92.9%～98.9%,日内相对标准偏差为3.2%～4.2%,日间相对标准偏差为4.4%～4.9%。结论该方法操作简便、灵敏度高，适用于对血清25-羟基维生素D3的快速检测。