IDH2野生型/突变型基因慢病毒包装及鉴定研究
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基金项目:国家自然科学基金项目(81560501);宁夏回族自治区人力资源和社会保障厅2017留学人员创新创业项目择优资助项目(宁人社函〔2017〕84号);宁夏回族自治区教育厅大学生创新训练项目(NXCX2018144)。


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    [摘要]目的构建异柠檬酸脱氢酶2 (IDH2)野生型/突变型基因慢病毒载体。 方法构建IDH2野生型、突变型质粒,采用聚合酶链反应(PCR)进行鉴定;对感染293T细胞,测定病毒滴度;对感染HEK293细胞,观察感染效率。 结果PCR鉴定结果显示,2组重组质粒在1.0~2.0 kb间各出现一条明显扩增带,片段大小与IDH2目的片段大小一致(1 359 bp)。对感染293T细胞观察发现,48 h后绿色荧光的强度和范围明显增加;病毒滴度为:1.0×108 TU/mL。感染HEK293细胞的效率在90 %以上。 结论IDH2野生型和突变型慢病毒构建成功,能够高效地感染细胞。

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引用本文

王世雄,乔健英,刘雪雪,曹相玫. IDH2野生型/突变型基因慢病毒包装及鉴定研究[J].现代医药卫生,2019,35(19):2929-

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