灰兜巴中过氧化物酶体增殖物激活受体γ活性部位的筛选
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基金项目:承德医学院重点课题项目( 201810 )。


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    [摘 要] 目的 通过构建过氧化物酶体增殖物激活受体 γ ( PPARγ )激动剂的细胞筛选模型,检测灰兜巴的不同极性提取物对 PPARγ 的激活效率。为开发新型、高效、安全的天然 PPARγ 激动剂提供可靠的实验依据。方法 采用Lipofectamine3000 转染试剂将重组质粒 pBIND-PPARγ-LBD 与报告质粒 pGL4.35 共同转入293T 细胞中,同时在 293T 细胞中只转染 pGL4.35 报告质粒作为阴性对照,以 PPARγ 激动剂人工合成配体吡格列酮作为阳性对照药,通过检测荧光素酶活性来计算灰兜巴的不同极性提取物对 PPARγ 的激活作用。所有结果均使用 Origin2021 软件分析计算,样品间差异有统计学意义( P <0.05 )。结果 阳性对照组加入 0.75μ mol/L 的吡格列酮后荧光强度较空白对照组荧光强度增加 1.27 倍,差异有统计学意义( P <0.05 ),阴性对照组加入吡格列酮后未见荧光素酶被激活;共转染细胞组加入不同浓度(400 、 200μ g/ mL 和 100 μ g/ mL )灰兜巴的不同极性提取物后,荧光素酶激活程度各不相同,其中 400μ g/ mL 的正己烷、正丁醇、水提醇沉上清、水提醇沉部分的激活能力相当于空白对照组的 145% 、 128% 、 147% 、 157% ,差异有统计学意义( P <0.01 )。结论 将PPARγ 重组质粒和报告质粒 pGL4.35 共转染入 293T 细胞中可作为PPARγ 激活能力的细胞筛选模型,灰兜巴正己烷、正丁醇、水提醇沉上清、水提醇沉提取物可作为 PPARγ 的天然激动剂。

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引用本文

张圣英,黄子婷,刘喜纲,杨坤宝.灰兜巴中过氧化物酶体增殖物激活受体γ活性部位的筛选[J].现代医药卫生,2023,39(11):1809-1813

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  • 在线发布日期: 2023-07-03
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