[摘 要] 目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)在高糖高脂诱导的心肌细胞损伤及氧化应 激中的作用。方法 高糖(33mmol/L)及不同浓度高脂(棕榈酸钠125、250、500、1000、2000、4000μmol/L) 不同时间(12、24、48、72h)干预 H9c2心肌细胞,选择合适的棕榈酸钠浓度及干预时间。后续将 H9c2心肌细胞 分为对照组(H9c2组)及高糖高脂组,应用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞培养液中 LDH 的活性,采用实 时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌细胞肥大指标心房钠尿肽(ANP)、α-心肌肌动蛋白(α-SKA)mRNA 的表达,通过 westernblotting技术检测高糖高脂干预 H9c2心肌细胞72hp38磷酸化/GAPDH 的蛋白表 达量,p38MAPK 的 特 异 性 抑 制 剂 (SB203580)分 别 测 定 各 组 中 活 性 氧 (ROS)、一 氧 化 氮 (NO)的 水 平。 结果 相比对照组,高糖高脂组 LDH 的释放率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。进一步用 TUNEL 法检测细胞凋亡,结果显示,相比对照组,高糖高脂组细胞凋亡指数也明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 高糖高脂可增加 H9c2 细胞中 ANP 及α-SKA mRNA 水平的表达,相比对照组,其 H9c2 细胞中 ANP 及 α- SKA mRNA 水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,高糖高脂组中p38磷酸化水平明 显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。高糖高脂组中的 NO 水平远远高于对照组,而 SB203580组中 NO 水 平明显低于高糖高脂组,差异均有统计学意义(P<0.05)。同样,高糖高脂组中的 ROS水平明显高于对照组, 而SB203580组中 NO 水平明显低于高糖高脂组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 p38MAPK 通路参 与高糖高脂诱导的心肌细胞损伤及氧化应激,通过抑制p38MAPK表达可以抑制高糖高脂诱导的氧化应激反应。