摘要:[摘 要] 目的 探讨干扰组蛋白去甲基化酶KDM3A 表达对肝星状细胞增殖和胶原合成的影响。 方法 首先乙醛处理大鼠肝星状细胞,用实时荧光定量PCR技术(RT-PCR)检测KDM3A mRNA 的表达。接 着利用慢病毒转染肝星状细胞72 h,干扰KDM3A 的表达,乙醛刺激后,收集肝星状细胞,采用噻唑蓝法检测细 胞增殖活性,酶联免疫吸附试验检测Ⅲ型和Ⅰ型胶原蛋白的含量,RT-PCR和蛋白质印迹法检测转化生长因子- β2(TGF-β2)的表达水平。结果 与对照组比较,乙醛处理组KDM3A mRNA 相对表达量升高约4倍(1.00± 0.10 vs. 4.00±0.20),TGF-β2 mRNA 相对表达量升高约3倍(1.00±0.40 vs. 3.00±0.50),差异均有统计学 意义(t=43.201、44.032,P <0.001)。干扰KDM3A 后,与对照组比较,转染组的细胞增殖活性下降约43.3% [转染组光密度值(0.38±0.06)低于对照组的(0.67±0.08)],Ⅲ型胶原蛋白含量下降约20.00%(1.00±0.10 vs. 0.80±0.04),Ⅰ型胶原蛋白含量下降约30.00%(1.00±0.10 vs. 0.70±0.04),TGF-β2 蛋白及mRNA 水 平也明显下降(1.00±0.10 vs. 0.70±0.10),差异均有统计学意义(t=12.272、12.621、21.369,P <0.001)。 结论 干扰组蛋白去甲基化酶KDM3A 可一定程度阻止肝星状细胞的增殖和胶原合成,机制可能是通过抑制 TGF-β2 表达来实现。