石河子大学自主支持立项项目(ZZZC202015A);石河子大学高层次人才项目(RCZK201954);石河子大学创新发展项目(CXFZ20218)
目的探究自噬过程在葡萄籽原花青素提取物(GSPE)缓解氟致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞毒性中的作用。方法用氟化钠(60 mg/L)处理SH-SY5Y细胞24 h构建氟染毒细胞模型,随机分为对照组、氟化钠组、氟化钠+低剂量GSPE组、氟化钠+中剂量GSPE组、氟化钠+高剂量GSPE组;采用细胞计数试剂-8法(CCK-8法)检测各组细胞活力值变化;采用Hoechst33342染色分析各组细胞凋亡水平变化;采用免疫荧光方法分析各组细胞LC3表达情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测cleaved-caspase 3、cleaved-PARP、LC3、p62等蛋白表达情况。随后纳入雷帕霉素重新分组,检测各组cleaved-PARP、LC3、p62等蛋白表达情况,并采用Hoechst33342染色分析各组细胞凋亡水平变化。结果与对照组比较,氟化钠组SH-SY5Y细胞凋亡水平显著提高(P<0.05),经GSPE干预后细胞活力上升且细胞自噬水平上升(P<0.05)。与氟化钠组比较,雷帕霉素干预可以有效抑制细胞凋亡,且雷帕霉素与原花青素联合后细胞自噬水平进一步提升(P<0.05)。结论GSPE能够抑制氟化钠诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,其作用可能与激活自噬有关。
龚泽林,王本杰,赵文欣,杨露.自噬在葡萄籽原花青素改善氟致SH-SY5Y细胞毒性中的作用[J].现代医药卫生,2024,40(20):3440-3446