国家自然科学基金项目(81760546)
目的探讨miR-4435通过调控细胞周期相关蛋白1(CAPRIN1)表达对鼻咽癌细胞生物学行为的影响。方法采用荧光定量聚合酶链式反应检测miR-4435在人鼻咽癌细胞系CNE-2Z、C666-1、SUNE-1、HNE-1和永生化鼻咽上皮细胞NP69中的表达水平。采用miR-4435模拟物和对照miR-NC转染C666-1细胞,分为miR-4435组和miR-NC组。比较2组C666-1细胞增殖、细胞周期变化情况,以及CAPRIN1 mRNA、CAPRIN1蛋白、周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、细胞周期蛋白B(Cyclin B)、Cyclin E蛋白表达水平。采用双荧光素酶活性报告实验验证miR-4435与CAPRIN1的靶向结合。结果与NP69细胞相比,CNE-2Z、C666-1、SUNE-1、HNE-1细胞中miR-4435相对表达水平显著下调(F=18.92,P<0.01),C666-1细胞中miR-4435相对表达水平下调最明显(P<0.01)。miR-NC组和miR-4435组miR-4435在C666-1细胞中的相对表达水平分别为(0.19±0.02)、(0.99±0.09),二者比较,差异有统计学意义(t=14.55,P<0.01)。与miR-NC组相比,miR-4435组C666-1细胞增殖能力在第2、3、4、5天时明显被抑制(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-4435组C666-1细胞在G0/G1期的细胞数量明显增加(t=4.69,P<0.01),而在S期和G2/M期的细胞数量明显减少(t=4.32,P<0.01;t=4.79,P<0.01)。转染miR-4435显著降低了含有CAPRIN1 WT的C666-1细胞荧光素酶活性(t=13.54,P<0.01)。miR-NC组、miR-4435组CAPRIN1 mRNA在C666-1细胞中的相对表达水平分别为(5.08±0.34)、(1.01±0.09),二者比较,差异有统计学意义(t=11.54,P<0.01)。与miR-NC组比较,miR-4435组C666-1细胞中CAPRIN1、CDK1、Cyclin B、Cyclin E蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论miR-4435能抑制鼻咽癌细胞增殖和细胞周期进展,并通过抑制CAPRIN1表达而作为抑癌基因发挥作用。
王挺 ,张杨 ,郭洁 ,范崇盛 △,蒋伟 . miR-4435对鼻咽癌细胞生物学行为的影响研究[J].现代医药卫生,2025,41(6):1297-1301